HRM法SNP分型服务
来源：本站 作者：jiyuanbio 时间：2025/5/23
HRM 技术助力 SNP 分型技术服务
在基因检测领域，单核苷酸多态性（SNP）分型作为探索遗传变异的关键技术，广泛应用于疾病关联研究、药物基因组学和群体遗传学等多个方面。高分辨率熔解曲线分析（High Resolution Melting，HRM）技术凭借其快速、准确、无需标记等特点，成为 SNP 分型的有力工具。我司可以为您提供HRM分型的服务。
一、HRM 的原理
HRM 技术的核心原理基于 DNA 双链在加热过程中解链的特性。当 DNA 双链受热时，碱基对之间的氢键逐渐断裂，双链解开成为单链，这个过程称为熔解。而 DNA 的熔解温度（Tm 值）主要由其碱基组成、长度和 GC 含量决定，不同的 DNA 序列，即使只有一个碱基的差异（即 SNP 位点），其 Tm 值也会有所不同。
在 HRM 分析中，首先对含有目标 SNP 位点的 DNA 片段进行 PCR 扩增。随后，在缓慢升温过程中，实时监测荧光信号。随着温度升高，DNA 双链逐渐解链，原本结合在双链 DNA 上的饱和荧光染料（如 LC Green、SYTO 9 等）会从 DNA 上脱离，导致荧光信号下降。通过仪器精确记录荧光强度随温度变化的曲线，即熔解曲线。由于 SNP 位点的存在会改变 DNA 片段的稳定性，使得含有不同等位基因的 DNA 片段熔解温度出现差异，从而在熔解曲线上呈现出不同的峰形。科研人员可以通过分析这些熔解曲线的差异，快速准确地判断样本的 SNP 基因型 。
二、送样要求
为确保 HRM 技术能够准确有效地进行 SNP 分型，规范的送样至关重要。以下是详细的送样要求：
（一）样本类型
- DNA或cDNA：要求 DNA 纯度高，无 RNA、蛋白质、酚类、盐类等杂质污染。A260/A280 比值应在 1.8 - 2.0 之间，A260/A230 比值应大于 2.0。
- 引物：请提供上下游引物，最好是摸索过退火温度的。如果没法提供引物。也可以帮忙设计引物，但要提供模板的序列。
（二）样本质量
- DNA 浓度：建议提供的 DNA 样本浓度在 50 - 200 ng/μL 之间，每个样本体积不少于 20 μL，即每个样本 DNA 总量不少于 1 μg。对于浓度较低的样本，需提前说明并提供足够的体积。
- DNA 完整性：基因组 DNA 应保持较好的完整性，电泳检测时主带清晰，无明显降解。若 DNA 降解严重，可能影响 PCR 扩增和 HRM 分析结果。
（三）样本标识与信息
- 每个样本必须有唯一且清晰的标识，可采用编号、条形码等方式。标识应与送样单上的信息完全一致，避免混淆。
- 送样时需同时提供详细的样本信息表，包括样本编号、样本类型、采集时间、保存条件、研究目的、目标 SNP 位点信息（如已知的 SNP 位点名称、染色体位置等）以及客户联系方式等。准确完整的信息有助于实验人员更好地开展检测工作。
（四）运输与保存
- DNA 样本：应将 DNA 样本分装到无菌、无酶的离心管中，密封后放入冰盒或干冰中运输。若短期保存（1 - 2 周），可将样本置于 -20℃冰箱；长期保存需置于 -80℃冰箱。
三、HRM 技术的应用优势与案例
HRM 技术不仅操作简便、成本较低，还能在短时间内对大量样本进行高通量分析。在实际应用中，例如在乳腺癌易感基因 BRCA1 和 BRCA2 的 SNP 分型研究中，HRM 技术能够快速准确地检测出与乳腺癌发病风险相关的 SNP 位点，为乳腺癌的早期筛查和个性化治疗提供重要依据。此外，在药物基因组学领域，通过 HRM 技术对药物代谢酶基因的 SNP 分型，可以预测患者对特定药物的代谢能力和不良反应，实现精准用药 。
HRM 技术以其独特的原理和显著的优势，为 SNP 分型提供了高效、可靠的解决方案。严格遵循送样要求，是获得准确检测结果的基础。无论是科研探索还是临床应用，HRM 技术都展现出巨大的潜力，有望在未来的基因检测领域发挥更加重要的作用。如果您对 HRM 技术或送样要求还有其他疑问，欢迎随时与我们联系，我们将竭诚为您解答。
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